Introduction : Le taux de métastases occultes des carcinomes épidermoïdes des VADS (CEVADS), est d’environ 30%. Leur présence a un impact pronostique significatif et leur diagnostic est capital. La technique du ganglion sentinelle a été validée pour les carcinomes de la cavité orale mais l’analyse extemporanée des ganglions (GG) a  une faible sensibilité. La technique OSNA (One-Step Nucleic Acid Amplification) a été validée pour l’analyse extemporanée des ganglions sentinelles des cancers du sein mais a été peu étudiée pour les cancers ORL. Objectif : Comparer la technique OSNA à l’analyse histologique standard dans les CEVADS cN0. Matériel et Méthode : Les ganglions (n=157) de 26 patients atteints d’un CEVADS cN0 ont été analysés prospectivement. Chaque GG a été coupé en 4 parties égales et une partie sur 2 a été alternativement analysée en OSNA et en histologie. Une IHC CK19 a été réalisée sur les tumeurs primitives. Une RT-qPCR de CK19, PVA et Epcam a été réalisée sur les lysats des ganglions discordants. Le seuil de positivité d’OSNA a été considéré à 250copies/µL. Résultats : La technique OSNA a été réalisable pour tous les GG et a permis de détecter 21 métastases.  Sur les 157 GG analysés (6.3 LN/patient), 139 (88.5%) étaient concordants dont 131 négatifs et 8 positifs. Les 18 GG (11.5%) discordants correspondaient à 13 OSNA+/HES-  (8.3%) et 5 OSNA-/HES+ (3.2%). L’IHC CK19 était positive sur la tumeur primitive chez 14 patients (53.8%). Après analyse complémentaire par RT-qPCR et identification des biais d’attribution liés au partage ganglionnaire, le taux de faux négatif d’OSNA a été de 1,3% (OSNA-/HES+) ; la sensibilité et la spécificité d’OSNA ont été de 90% et 95.6%, la VPP et la VPN ont été 75% et 98.5%. Conclusion : Cette étude a montré la faisabilité de la technique OSNA dans un temps compatible avec une analyse intra-opératoire. Le taux de faux négatifs est faible. La sensibilité reste cependant insuffisante.  L’utilisation de marqueurs multiples pourrait permettre d’optimiser la technique.