L’ingénierie tissulaire constitue une approche prometteuse pour la reconstruction des tissus parodontaux. Dans ce domaine, les cellules souches mésenchymateuses (CSM) sont particulièrement attrayantes du fait de leurs caractéristiques uniques et de leur rôle majeur dans la réparation osseuse. Des CSM d’origine pulpaire et ligamentaire ont été obtenues à partir d’explants dentaires et caractérisées par cytométrie en flux et tests fonctionnels. Le modèle des sphéroïdes a été utilisé pour évaluer le comportement des CSM en 3D. Les milieux conditionnés de CSM ligamentaires, contenant leur sécrétome, ont été recueillis et leurs effets sur la différenciation ostéoblastique étudiés. L’association d’un verre bioactif (46S6) au Vanadium a été évaluée pour un futur protocole d’ingénierie tissulaire. Les caractérisations phénotypique et fonctionnelle ont permis d’objectiver la présence de CSM dans le ligament alvéolo-dentaire et dans la pulpe dentaire. La culture sous forme de sphéroïdes a permis de potentialiser la différenciation des CSM, avec cependant une diminution des diamètres des sphéroïdes et une chute du nombre de cellules constitutives. Les milieux conditonnés de CSM ligamentaires ont eu un effet, en particulier via les exosomes, sur des cellules de lignées ostéoblastiques. Le 46S6 s’est avéré de forte biocompatibilité avec les CSM, bien que l’ajout de Vanadium n’ait pas eu l’effet escompté.