En plus de leur rôle central dans l'hémostase, les plaquettes sanguines sont désormais reconnues comme des acteurs importants de la réponse inflammatoire aiguë. Notre hypothèse était que l'inhibition de l'activation plaquettaire par la voie du récepteur P2Y12 pourrait permettre de moduler la réponse inflammatoire associée aux états septiques graves et aux circulations extracorporelles. Nous avons développé une approche transversale, basée sur l’utilisation de modèles précliniques (modèle murin de sepsis, modèle in-vitro de stimulation de sang total par LPS, évaluation d'un dispositif de récupération sanguine peropératoire), associés à l’analyse de données cliniques. Ce travail démontre que le traitement par ticagrelor est associé à une diminution de la réponse inflammatoire et des lésions d'agression pulmonaire aigüe dans un modèle murin de sepsis polymicrobien (cecal slurry). Ces résultats permettent d'envisager plusieurs hypothèses mécanistiques, associant l’inhibition plaquettaire à des mécanismes extraplaquettaires, qui devront être évaluées dans des études complémentaires. Nous avons également mis en évidence une association indépendante entre la transfusion peropératoire de concentrés plaquettaires déleucocytés et la survenue de bactériémies en post-opératoire de chirurgie cardiaque sous circulation extracorporelle. Ce résultat permet d'envisager un rôle direct des plaquettes allogéniques et des médiateurs inflammatoires issus du stockage des concentrés plaquettaires. Enfin, nous avons pu montrer que le CD40L soluble, principalement d'origine plaquettaire, était précocement associé aux formes sévères de COVID-19 et pourrait constituer un biomarqueur d'intérêt dans ce contexte. Ces données constituent un rationnel solide pour développer de futurs travaux de recherche clinique et translationnelle évaluant l'utilisation d'approches pharmacologiques d'inhibition plaquettaire dans l’objectif d’améliorer le devenir des patients en soins critiques sous assistance extracorporelle.

Le dispositif i-Sep (SAME®, Nantes, France) est le premier système d’autotransfusion basé sur la filtration capable de récupérer et de laver à la fois les plaquettes et les globules rouges à partir du sang épanché lors d’une intervention. Cette étude est la première évaluation ex vivo du dispositif i-Sep sur du sang total humain dont l’objectif est de démontrer l’efficacité sur la récupération cellulaire et la sécurité en termes d’activation cellulaire et de qualité de lavage. Trente poches de sang total humain traitées par le dispositif au cours de deux cycles consécutifs. Des échantillons ont été prélevés à partir du sang dilué du bac de recueil et à partir du sang concentré traité par le dispositif. Des analyses ont été effectuées pour chaque série d'échantillons. Une numération cellulaire a été réalisée pour mesurer les taux de récupération des cellules sanguines au cours du traitement. L'impact sur l'intégrité des globules rouges a été évalué par ektacytométrie et par la mesure de l’hémolyse. La cytométrie en flux a été utilisée pour évaluer l'état d'activation et la fonction des plaquettes et des globules blancs récupérés. Enfin, l'héparine, les facteurs de coagulation et les principales protéines plasmatiques ont été mesurées afin d’évaluer la qualité du lavage. Aucune défaillance du dispositif n’a été observée, démontrant le bon fonctionnement du dispositif d'autotransfusion i-Sep dans des conditions normales d'utilisation. Le rendement global en globules rouges était de 88% et l'hématocrite final était de 49% Le rendement plaquettaire global était de 37%. Concernant la qualité des cellules obtenues après le traitement, l'analyse par ektacytométrie a montré que les globules rouges n'étaient pas altérés et l'analyse par cytométrie en flux a montré que les globules blancs étaient viables et non activés par le dispositif. Les plaquettes ont été faiblement activées par le traitement mais conservaient leur capacité à être activées par la thrombine. Enfin, les performances de lavage du dispositif i-Sep étaient excellentes pour l'héparine, les immunoglobulines, l'albumine et les facteurs de coagulation. Cette étude démontre les performances et la sécurité du nouveau dispositif d’autotransfusion i-Sep. Pour la première fois, les globules rouges et les plaquettes ont pu être récupérés sans impact significatif sur leur intégrité et leur fonction tandis que la sécurité a été démontrée par l’absence d’activation leucocytaire et la qualité de lavage de l’héparine et des protéines plasmatiques.