| Détection des métastases ganglionnaires des carcinomes épidermoïdes de la tête et du cou par la technique OSNA (One-step nucleic acid amplification for detecting lymph node metastasis of head and neck squamous cell carcinoma) Peigné, Lucie - (2018-10-09) / Universite de Rennes 1 - Détection des métastases ganglionnaires des carcinomes épidermoïdes de la tête et du cou par la technique OSNA
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Langue : Anglais Directeur(s) de thèse: Jegoux, Franck Discipline : Medecine Classification : Médecine et santé Mots-clés : Ganglion, OSNA carcinome épidermoïde VADS, histologie , CK19 , micro métastase, ganglion sentinelle
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Résumé : Introduction : Le taux de métastases occultes des carcinomes épidermoïdes des VADS (CEVADS), est d’environ 30%. Leur présence a un impact pronostique significatif et leur diagnostic est capital. La technique du ganglion sentinelle a été validée pour les carcinomes de la cavité orale mais l’analyse extemporanée des ganglions (GG) a une faible sensibilité. La technique OSNA (One-Step Nucleic Acid Amplification) a été validée pour l’analyse extemporanée des ganglions sentinelles des cancers du sein mais a été peu étudiée pour les cancers ORL. Objectif : Comparer la technique OSNA à l’analyse histologique standard dans les CEVADS cN0. Matériel et Méthode : Les ganglions (n=157) de 26 patients atteints d’un CEVADS cN0 ont été analysés prospectivement. Chaque GG a été coupé en 4 parties égales et une partie sur 2 a été alternativement analysée en OSNA et en histologie. Une IHC CK19 a été réalisée sur les tumeurs primitives. Une RT-qPCR de CK19, PVA et Epcam a été réalisée sur les lysats des ganglions discordants. Le seuil de positivité d’OSNA a été considéré à 250copies/µL. Résultats : La technique OSNA a été réalisable pour tous les GG et a permis de détecter 21 métastases. Sur les 157 GG analysés (6.3 LN/patient), 139 (88.5%) étaient concordants dont 131 négatifs et 8 positifs. Les 18 GG (11.5%) discordants correspondaient à 13 OSNA+/HES- (8.3%) et 5 OSNA-/HES+ (3.2%). L’IHC CK19 était positive sur la tumeur primitive chez 14 patients (53.8%). Après analyse complémentaire par RT-qPCR et identification des biais d’attribution liés au partage ganglionnaire, le taux de faux négatif d’OSNA a été de 1,3% (OSNA-/HES+) ; la sensibilité et la spécificité d’OSNA ont été de 90% et 95.6%, la VPP et la VPN ont été 75% et 98.5%. Conclusion : Cette étude a montré la faisabilité de la technique OSNA dans un temps compatible avec une analyse intra-opératoire. Le taux de faux négatifs est faible. La sensibilité reste cependant insuffisante. L’utilisation de marqueurs multiples pourrait permettre d’optimiser la technique. Abstract : BACKGROUND: In head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) 30% of cN0 patients have occult metastasis. LN invasion is a major prognostic factor. Sentinel lymph node (SLN) is an option for cN0 neck management. One-step nucleic acid amplification (OSNA) used to analyze SLN in breast cancer is a candidate to get more reliable intraoperative HNSCC lymph node (LN) staging. OBJECTIVE: To compare OSNA analysis to standard pathological analysis in cN0 HNSCC. MATERIALS AND METHODS: 157 LN from 26 cN0 HNSCC patients were prospectively analyzed (6.3LN/patient). Exclusion criteria were previous surgery or radiotherapy. Each node was cut into 4 equal pieces alternatively sent to pathological analysis and OSNA technique. IHC CK19 was performed on the primary tumor biopsy and RT-PCRq of CK19, PVA, EPCAM on the LN lysate of discordant cases. RESULTS: OSNA detected 21 metastases. There were 139 concordant LN (88.5%). There were 18 initial discordant LN (11.5%), 13 (8.3%) were OSNA positive/pathological analysis negative, 5 (3.2%) were OSNA negative/pathological analysis positive. After elimination of allocation bias, false negative OSNA rate was 1.3%, sensitivity and specificity were 90% and 95.6%, PPV and NPV were 75% and 98.5%. CONCLUSION: OSNA is able to give intraoperative result in a short time and to diagnose micro metastasis in cN0 HNSCC with a low false negative rate. A multimarker test could be the solution to adapt OSNA in cN0 HNSCC. Study registered under clinicaltrials.gov database number NCT02852343. | |||