SCD-Universite de Rennes 1 Détection des métastases ganglionnaires des carcinomes épidermoïdes de la tête et du cou par la technique OSNA One-step nucleic acid amplification for detecting lymph node metastasis of head and neck squamous cell carcinoma GanglionOSNA carcinome épidermoïde VADShistologie CK19 micro métastaseganglion sentinelle Lymph nodeOSNA,head and neck squamous cell carcinoma pathological analysisCK19sentinel lymph node biopsymicrometastasis Voies aéro-digestives supérieures Cancer Thèses et écrits académiques Noeud lymphatique sentinelle Thèses et écrits académiques Métastases Thèses et écrits académiques Dépistage (médecine) Thèses et écrits académiques Introduction : Le taux de métastases occultes des carcinomes épidermoïdes des VADS (CEVADS), est d’environ 30%. Leur présence a un impact pronostique significatif et leur diagnostic est capital. La technique du ganglion sentinelle a été validée pour les carcinomes de la cavité orale mais l’analyse extemporanée des ganglions (GG) a  une faible sensibilité. La technique OSNA (One-Step Nucleic Acid Amplification) a été validée pour l’analyse extemporanée des ganglions sentinelles des cancers du sein mais a été peu étudiée pour les cancers ORL. Objectif : Comparer la technique OSNA à l’analyse histologique standard dans les CEVADS cN0. Matériel et Méthode : Les ganglions (n=157) de 26 patients atteints d’un CEVADS cN0 ont été analysés prospectivement. Chaque GG a été coupé en 4 parties égales et une partie sur 2 a été alternativement analysée en OSNA et en histologie. Une IHC CK19 a été réalisée sur les tumeurs primitives. Une RT-qPCR de CK19, PVA et Epcam a été réalisée sur les lysats des ganglions discordants. Le seuil de positivité d’OSNA a été considéré à 250copies/µL. Résultats : La technique OSNA a été réalisable pour tous les GG et a permis de détecter 21 métastases.  Sur les 157 GG analysés (6.3 LN/patient), 139 (88.5%) étaient concordants dont 131 négatifs et 8 positifs. Les 18 GG (11.5%) discordants correspondaient à 13 OSNA+/HES-  (8.3%) et 5 OSNA-/HES+ (3.2%). L’IHC CK19 était positive sur la tumeur primitive chez 14 patients (53.8%). Après analyse complémentaire par RT-qPCR et identification des biais d’attribution liés au partage ganglionnaire, le taux de faux négatif d’OSNA a été de 1,3% (OSNA-/HES+) ; la sensibilité et la spécificité d’OSNA ont été de 90% et 95.6%, la VPP et la VPN ont été 75% et 98.5%. Conclusion : Cette étude a montré la faisabilité de la technique OSNA dans un temps compatible avec une analyse intra-opératoire. Le taux de faux négatifs est faible. La sensibilité reste cependant insuffisante.  L’utilisation de marqueurs multiples pourrait permettre d’optimiser la technique. BACKGROUND: In head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) 30% of cN0 patients have occult metastasis. LN invasion is a major prognostic factor. Sentinel lymph node (SLN) is an option for cN0 neck management. One-step nucleic acid amplification (OSNA) used to analyze SLN in breast cancer is a candidate to get more reliable intraoperative HNSCC lymph node (LN) staging. OBJECTIVE: To compare OSNA analysis to standard pathological analysis in cN0 HNSCC. MATERIALS AND METHODS: 157 LN from 26 cN0 HNSCC patients were prospectively analyzed (6.3LN/patient). Exclusion criteria were previous surgery or radiotherapy. Each node was cut into 4 equal pieces alternatively sent to pathological analysis and OSNA technique. IHC CK19 was performed on the primary tumor biopsy and RT-PCRq of CK19, PVA, EPCAM on the LN lysate of discordant cases. RESULTS: OSNA detected 21 metastases. There were 139 concordant LN (88.5%). There were 18 initial discordant LN (11.5%), 13 (8.3%) were OSNA positive/pathological analysis negative, 5 (3.2%) were OSNA negative/pathological analysis positive. After elimination of allocation bias, false negative OSNA rate was 1.3%, sensitivity and specificity were 90% and 95.6%, PPV and NPV were 75% and 98.5%. CONCLUSION: OSNA is able to give intraoperative result in a short time and to diagnose micro metastasis in cN0 HNSCC with a low false negative rate.  A multimarker test could be the solution to adapt OSNA in cN0 HNSCC. Study registered under clinicaltrials.gov database number NCT02852343. Electronic Thesis or DissertationText en application/pdf1 : 1849 Kohttps://ged.univ-rennes1.fr/nuxeo/site/esupversions/97a3c090-9f20-4d7b-8658-97f2f627f5e4 Peigné Lucie 1987-05-03 FR 233529047 peigne.lucie@gmail.com 2018REN1M107 http://www.theses.fr/2018REN1M107 2018-10-09 Medecine Universite de Rennes 1thesis.degree.grantor_1 02778715X Doctorat (thèse d'exercice) Universite Bretagne LoirepartenaireRecherche_1 191639044 non ouiJegouxFranckintervenant_1069422796 ddc:610 JegouxFranckUniversite de Rennes 1Sciences et technologie, medecine, pharmacie, odontologie, droit, economie, gestion, philosophieUniversite Bretagne Loire Communaute etablissements d enseignement superieur et de recherche (ComuE) ASCII PDF 1893704 restriction 2018-10-09 2019-04-09 restriction 2018-10-09 2019-04-09