SCD-Universite de Rennes 1 Mécanismes moléculaires impliqués dans la liaison des +TIPs aux microtubules Molecular mechanisms involved in the interaction between +TIPs and microtubules Microtubules+TIPsEB1Cryo-microscopie électroniqueCryo-tomographie électronique MicrotubulesThèses et écrits académiques Les microtubules (MTs) sont des constituants hautement dynamiques du cytosquelette, impliqués dans de nombreux processus cellulaires tels que la division cellulaire ou le transport d'organites. Leur comportement dynamique est régulé par différents facteurs tels que les +TIPs, qui présentent la particularité de cibler les extrémités en croissance des MTs. Une de ces protéines, EB1, cible de façon autonome ces extrémités et y recrute un grand nombre d'autres +TIPs. Néanmoins, les mécanismes moléculaires impliqués dans cette reconnaissance restent imprécis. Afin de mettre en évidence une caractéristique structurale présente à l'extrémité des MTs en croissance et préférentiellement reconnue par EB1, nous avons utilisé deux approches de cryo-microscopie électronique. Nous avons tout d'abord utilisé une approche d'analyse par particules isolées, dans le but de comparer les reconstructions 3D de MTs assemblés en présence de GTP ou de GMPCPP, analogue lentement hydrolysable du GTP. Par la suite, nous avons utilisé la cryo-tomographie électronique couplée au marquage d'EB1 avec des nanoparticules d'or fonctionnalisées. Nos résultats nous permettent de proposer un modèle de ciblage impliquant une relocalisation de l'extrémité C-terminale d'EB1 lors de la fermeture des feuillets en tube. Cette relocalisation permettrait de recruter les autres +TIPs, et entraînerait une perte d'affinité d'EB1 pour la paroi des microtubules. La comparaison de ces résultats avec des études récentes effectuées par d'autres équipes, et concernant le rôle de l'hydrolyse du GTP dans la liaison d'EB1 avec les MTs, nous permet de proposer un modèle global incluant l'ensemble de ces données. Microtubules (MTs) are highly dynamic cytoskeleton polymers, involved in many cellular processes, including cell division and intracellular transport. Their dynamic behavior is regulated by numerous factors, such as +TIPs that preferentially target MT growing ends. Electronic Thesis or DissertationText fr application/pdf1 : 56103 Kohttps://ecm.univ-rennes1.fr/nuxeo/site/esupversions/59b8f55e-7404-44d8-952c-53cd00caf4f7 Guesdon Audrey 1984-06-23 FR 183986164audrey.guesdon@hotmail.com 2013REN1S196 http://www.theses.fr/2013REN1S196 2013-06-20 Biologie Universite de Rennes 1thesis.degree.grantor_1 02778715X Doctorat non ouiChrétienDenisintervenant_1130631876 Vie-Agro-SantéecoleDoctorale_1 13908620X Université européenne de BretagnepartenaireRecherche_1 139075119 IGDRpartenaireRecherche_2 178579254 ddc:570 ChrétienDenisUniversite de Rennes 1Sciences et technologie, medecine, pharmacie, odontologie, droit, economie, gestion, philosophieVie-Agro-SantéÉcole doctorale Vie-Agro-Santé (Rennes)Université européenne de BretagneIGDR ASCII PDF 57449648