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| Diversité des polysaccharides capsulaires et des désoxyribonucléases sécrétés par les bactéries du genre Mycoplasma infectant les animaux de rente (Diversity of secreted capsular polysaccharides and deoxyribonucleases by bacteria from the genus Mycoplasma infecting livestock) Vastel, Manon - (2024-12-10) / Université de Rennes - Diversité des polysaccharides capsulaires et des désoxyribonucléases sécrétés par les bactéries du genre Mycoplasma infectant les animaux de rente
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Langue : Français, Anglais Directeur(s) de thèse: Gaurivaud, Patrice; Tardy, Florence Discipline : Microbiologie, virologie, parasitologie Laboratoire : ANSES - Ploufragan Ecole Doctorale : EGAAL Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie Mots-clés : Mycoplasma, polysaccharides capsulaires, désoxyribonucléases sécrétées, ruminants, porcs, volailles
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Résumé : Plusieurs espèces appartenant au genre bactérien Mycoplasma sont responsables d'infections chez les ruminants, les porcs et les volailles, entraînant des pertes économiques majeures dans ces secteurs de production. Chez les bactéries pathogènes, dont les mycoplasmes, certains éléments sécrétés sont impliqués dans l’interaction hôte-pathogène. Ces travaux de thèse visent à examiner au sein de différentes espèces la présence de deux éléments du sécrétome mycoplasmique : (i) la capsule polysaccharidique (CPSs) et (ii) les nucléases à activité DNasique. Parmi les espèces étudiées, un β-(1->6)-glucane à variation de phase a été mis en évidence chez le pathogène aviaire M. iowae avec, comme chez les mycoplasmes des ruminants, une diversité intra-espèce. L’étude de la sécrétion des CPSs par des approches biochimiques a également contribué à la mise en évidence de la production d’une capsule de β-(1->6)-glucofuranose sécrété par M. fermentans. Il s’agit de la première description de ce CPS sous forme d’homopolymère chez les bactéries. La reconstruction in silico des voies métaboliques des CPSs élargie à d’autres espèces de mycoplasmes a permis d’introduire des éléments de classification des synthases, enzymes permettant la polymérisation des polysaccharides, et leur export à la capsule. Concernant la présence de nucléases à activité DNasique, trois méthodes ont été testées, basées sur l’observation de la dégradation in vitro de trois sources d’ADN. Les résultats des trois tests sont concordants. Ils ont mis en évidence la capacité de M. gallisepticum et M. iowae infectant les volailles, et de M. hyopneumoniae, M. hyorhinis et M. flocculare infectant les porcs à dégrader les ADNs. En revanche, nous n’avons pas détecté de DNases sécrétées par M. synoviae et certains mycoplasmes appartenant au cluster mycoides. Ces résultats pourraient aider à mettre en lien la diversité intra et inter-espèce des éléments sécrétés et les pouvoirs pathogènes variables des bactéries du genre Mycoplasma. Abstract : Several species belonging to the bacterial genus Mycoplasma are responsible for infections in ruminants, swine and poultry, leading to major economic losses in these production sectors. In pathogenic bacteria, including mycoplasmas, certain secreted elements are involved in the host-pathogen interaction. The aim of this thesis is to examine the presence of two elements of the mycoplasmic secretome in different species: (i) the polysaccharide capsule (CPSs) and (ii) DNasic nucleases. Among the species studied, β-(1->6)-glucan with a phase variation was highlighted in the avian pathogen M. iowae with, as in ruminant mycoplasmas, intra-species diversity. The study of CPS secretion using biochemical approaches has also contributed to the highlight of the production of a β-(1->6)-glucofuranose capsule secreted by M. fermentans. This is the first description of this CPS as an homopolymer in bacteria. The in silico reconstruction of the metabolic pathways of CPSs extended to other Mycoplasma species allows the introduce of new elements of classification of synthases, enzymes enabling the polymerization of polysaccharides, and their export to the capsule. Concerning the presence of DNasic nucleases, three methods were tested, based on the observation of in vitro degradation of three DNA sources. The results of all three tests were concordant. They highlighted the ability of M. gallisepticum and M. iowae infecting poultry, and M. hyopneumoniae, M. hyorhinis and M. flocculare infecting pigs to degrade DNAs. In contrast, we did not detect DNases secreted by M. synoviae and certain mycoplasmas belonging to the mycoides cluster. These results could help to link the intra and inter-species diversity of secreted elements to the variable pathogenicity of Mycoplasma bacteria. | |||