SCD-Universite de Rennes 1 Identification d'une nouvelle mutation du gène CTNNA1 prédisposant aux mélanomes : génotype, phénotype, conséquences moléculaires et fonctionnelles A novel CTNNA1 loss-of-function variant predisposes to familial melanoma Mélanomes familiauxCTNNA1α-catenin Familial melanoma CTNNA1 alpha-catenin Mélanome Antioncogènes Au cours d’un suivi clinique, nous avons identifié une nouvelle mutation tronquante germinale de CTNNA1 dans une famille atteinte de multiples mélanomes précoces. CTNNA1 est un gène suppresseur de tumeur, altéré de façon somatique dans environ 3 % des mélanomes. Des mutations germinales de ce gène ont déjà été décrites dans des familles prédisposées aux cancers du sein lobulaires ou aux cancers gastriques diffus : CTNNA1 nous a donc semblé être un bon candidat pour expliquer l'incidence élevée et précoce de mélanome dans cette famille. Nous avons généré des lignées cellulaires de mélanomes humains invalidées de façon stable pour CTNNA1 pour étudier les conséquences de la perte de CTNNA1. Les tests fonctionnels effectués sur ces lignées CTNNA1 KO, ont montré une augmentation significative de leur capacité à former des colonies et perte de capacité à former des sphéroïdes. Au total, données cliniques et in vitro à l’appui, nous rapportons ici pour la première fois l’implication d’une mutation germinale de CTNNA1 dans le mélanome familial. L’identification de ce type de mutation dans des familles atteintes de mélanomes multiples, sans gène de prédisposition identifié à ce jour, pourrait aider le conseil génétique. Enfin, une meilleure compréhension de l’oncogenèse dans ce contexte génétique particulier, pourrait aider à proposer une thérapeutique personnalisée, visant notamment à rétablir l’adhésion cellulaire. Introduction: Approximately 10% of melanomas occur in a context suggesting hereditary predisposition. A clear molecular explanation has only been established for 20% of families. In the course of clinical care, we identified a new CTNNA1 truncating germline mutation in a family affected by multiple early-onset melanomas. Methods: We sequenced CTNNA1 by NGS first in the tumour of the index case, and then by Sanger method in the germline DNA of family members. CGH-array was performed on tumoral DNA. Immunochemistry was employed to evaluate the level of α-catenin (encoded by CTNNA1) in the patient's samples. CTNNA1 knock-out human melanoma cell lines were generated to investigate the functional effects of CTNNA1 loss. Functional assays, including colony formation, 3-D tumour spheroid formation, wound healing, and transwell invasion were performed in order to evaluate the role of CTNNA1 on proliferation, migration and invasion. Results: A cosegregation of the CTNNA1 mutation in individuals with melanoma was found in the family. CGH array identified a segmental loss on chromosome 5, leading to a loss of heterozygosity of CTNNA1, resulting in a loss of α-catenin observed by IHC. Functional assays performed on CTNNA1 KO melanoma cell lines showed an invasive phenotype. Conclusion: Altogether, our results strongly support that CTNNA1 loss of function predisposes to melanoma formation via a direct effect on cell adhesion. Since germline CTNNA1 alterations have already been implicated in familial lobular breast cancers and diffuse gastric cancers, CTNNA1, constitutes a good candidate tumour suppressor gene to be involved in familial melanoma, thus broadening the spectrum of syndromes associated with this gene. Electronic Thesis or DissertationText fr application/pdf1 : 4733 Kohttps://ged.univ-rennes1.fr/nuxeo/site/esupversions/d8c81c97-c244-4d11-86a5-dfd750a8a129 Masson Laure 1993-03-10 FR 252831942 laure.masson2@free.fr 2020REN1M119 http://www.theses.fr/2020REN1M119 2020-09-24 Medecine Universite de Rennes 1thesis.degree.grantor_1 02778715X Doctorat (thèse d'exercice) non ouiBoussemartLiseintervenant_1149216580 ddc:610 BoussemartLiseUniversite de Rennes 1Sciences et technologie, medecine, pharmacie, odontologie, droit, economie, gestion, philosophie ASCII PDF 4846881 restriction 2020-09-24 2021-09-24 confidentialité 2020-09-24 2021-06-30 restriction 2020-09-24 2021-09-24