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Modélisation de la colonisation nasale de Staphylococcus aureus chez la souris (Murine model of nasal colonization by Staphylococcus aureus) Grolhier, Claire - (2018-03-16) / Universite de Rennes 1 - Modélisation de la colonisation nasale de Staphylococcus aureus chez la souris
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Langue : Français Directeur(s) de thèse: Donnio, Pierre Yves Discipline : Pharmacie Classification : Médecine et santé Mots-clés : Staphylococcus aureus, colonisation nasale, modèle murin, JSNZ, ARN régulateurs bactériens
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Résumé : Vingt pour cent de la population est porteur nasal de Staphylococcus aureus. Les porteurs ont plus de risque de développer une infection que les non-porteurs, et les isolats de portage et d’infection sont identiques huit fois sur dix. Parmi les 160 ARNs régulateurs découverts, certains d’entre eux pourraient être des déterminants du passage de l’état de colonisation à celui d’infection. L’objectif est de mettre en place un modèle de colonisation nasale par S. aureus afin d’étudier in vivo l’expression des ARNs régulateurs. Les souches staphylococciques testées sont d’origine humaine (P11R) ou murine (JSNZ). La colonisation était observée chez 43/66 (65%) et 23/25 (92%) des souris avec P11R et JSNZ respectivement. Des souches endogènes à la souris appartenant aux clones ST15, ST5 et ST30 existent, et peuvent émerger durant les expérimentations. S. aureus est quantifié au sein du museau par PCR ciblant la thermonucléase nuc. Les extraits d’ARN sont ensuite analysés en ciblant l’ARNtm. Puisque la quantité bactérienne persistante est trop faible, la mesure de l’expression in vivo d’ARN de S. aureus reste encore un challenge. Abstract : Twenty percent of people carry Staphylococcus aureus in nostrils. Carriers are more at risk to develop an infection than no-carriers, and isolates from nose and infection are the same eight times out of ten. Among the 160 regulatory RNAs discovered as far, some of them could be involved in the colonization/infection switch. We aim to establish a murine model of nasal colonization by S. aureus to study the expression of regulatory RNAs in vivo. The staphylococci strains we used originate from human (P11R) or mice (JSNZ). Colonization was observed in 43/66 (65%) and 23/25 (92%) of animals with P11R and JSNZ, respectively. Murine-adapted S. aureus belonging to ST15, ST5 or ST30 clones exist, and can emerge during experiments. S. aureus has been quantified in the snout by PCR targeting the thermonuclease gene nuc. The RNA extracts have been then analyzed by targeting mtRNA. Since the quantity of bacteria persisting in mice nostrils is too low, measure of S. aureus RNAs is still a challenge. |