| Adaptation of expansion microscopy for the study of xenopus egg extract spindle architecture ( Adaptation de la microscopie d'expansion à l'étude de l'architecture des fuseaux assemblés en extraits d'ovocytes de xénopes ) Guilloux, Gabriel - (2024-12-04) / Université de Rennes Adaptation of expansion microscopy for the study of xenopus egg extract spindle architecture
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Langue : Anglais Directeur(s) de thèse: Gibeaux, Romain; Duchesne, Laurence Discipline : Biologie cellulaire, biologie du développement Laboratoire : IGDR Ecole Doctorale : SVS Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie Mots-clés : Extraits d'ovocytes de xénope, Microtubule, Fuseau, Microscopie d'expansion
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Résumé : La division cellulaire est un processus fondamental à la vie, assurant la répartition de l’ADN lors de la mitose. Au cœur de ce processus se trouve le fuseau, une structure composée principalement de microtubules. Son assemblage et son fonctionnement corrects sont essentiels à la stabilité génomique, car les défauts de ségrégation des chromosomes peuvent entraîner une aneuploïdie, associée à diverses maladies. Malgré des progrès significatifs dans notre compréhension de l'assemblage et l’organisation du fuseau, son architecture détaillée reste en partie incomprise à cause de ses dimensions, sa densité en microtubules et sa variabilité inter-espèces. Cependant, ces variations offrent également l'opportunité d'explorer comment l'architecture du fuseau s'adapte aux contraintes spécifiques de chaque espèce. Dans ce contexte, ma thèse visait à étudier l'architecture du fuseau de X. laevis et X. tropicalis en utilisant la microscopie d'expansion (ExM), qui permet l’agrandissement physique des échantillons pour améliorer la résolution. En adaptant l’ExM aux fuseaux assemblés en extraits d’ovocytes de xénopes, j'ai apporté une analyse détaillée de leur organisation, révélant des différences clés spécifiques à chaque espèce concernant la taille et la distribution des bundles de microtubules. Ces différences peuvent refléter des adaptations aux environnements cellulaires spécifiques à chaque espèce, contribuant à une meilleure compréhension de la régulation de l’architecture des fuseaux. Abstract : Cell division is a fundamental process for life, ensuring the distribution of DNA during mitosis. Central to this process is the spindle, a structure primarily composed of microtubules. Its proper assembly and function are critical for genomic stability, as defects in chromosome segregation can lead to aneuploidy, associated with various diseases. Despite significant progress in our understanding of spindle assembly and organization, its fine architecture remains incompletely understood due to its dimensions, density in microtubules and interspecies variabilities. However, these variations also present an opportunity to explore how spindle architecture adapts to the specific constraints of each species. In this context, my thesis aimed to investigate the spindle architecture of X. laevis and X. tropicalis using expansion microscopy (ExM) that allows physical enlargement of samples to improve the resolution. By adapting ExM to Xenopus egg extract spindles, I provided a detailed analysis of their organization, revealing species-specific differences regarding the size and distribution of microtubule bundles. These differences may reflect adaptations to each species-specific cellular environments, contributing to a better understanding of spindle architecture regulation. | |||