| Caractérisation moléculaire des leucémies à grands lymphocytes à grains (Molecular characterization of large granular lymphocytic leukemia) Pastoret, Cédric - (2023-11-24) / Université de Rennes - Caractérisation moléculaire des leucémies à grands lymphocytes à grains
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Langue : Français, Anglais Directeur(s) de thèse: Lamy de la Chapelle, Thierry; Fest, Thierry Discipline : Cancérlogie Laboratoire : MOBIDIC Ecole Doctorale : SVS Classification : Médecine et santé Mots-clés : Leucémie à grands lymphocytes à grains, TET2, cellules NK, mutations, répertoire TRBV2
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Résumé : La leucémie à grands lymphocytes à grains (LGLG) est un syndrome lymphoprolifératif rare, divisé en deux entités : LGLG-T et LGLG-NK. Différencier une prolifération réactionnelle d’une authentique LGLG-NK constitue une difficulté diagnostique majeure. Nous avons développé un score basé sur la lymphocytose NK, le répertoire KIR et le profil mutationnel d’une cohorte de 114 patients, montrant une sensibilité de 83% et une spécificité de 96% pour le diagnostic de LGLG-NK. De plus, nous avons décrit pour la première fois une mutation du gène TET2 dans 34% des LGLG. Par une analyse d'exome sur les cellules NK, T et myéloïdes triées, nous avons montré que la mutation TET2 pouvait être acquise précocément dans l'histoire de la maladie, éventuellement au sein d'une hématopoïèse clonale. Dans la deuxième partie de ce travail, nous avons analysé le répertoire TCR par séquençage haut-débit de 49 patients LGLG-T inclus dans le protocole national de traitement de première ligne. Nous avons ainsi identifié une surreprésentation du gène TRBV2 dans les clonotypes de LGLG par rapport aux témoins sains. Les 5 patients TRBV2+ présentaient une neutropénie plus profonde, une faible lymphocytose et un profil cytokinique particulier (IL-15, IL-17 et TNFa augmentées). Deux d’entre eux ont vu leur LGLG se transformer en lymphome T de haut grade. L’analyse séquentielle de l’exome complet de ces 2 cas a permis d’identifier la mutation du gène TP53 comme un élément crucial du processus de transformation. Ce travail a permis d’améliorer les connaissances sur le profil moléculaire des LGLG et ouvre de nouvelles perspectives thérapeutiques dans cette pathologie rare. Abstract : Large granular lymphocytic leukemia (LGLL) is a rare lympho- proliferative disorder, divided into two subtypes: T-cell LGLL and NK-cell LGLL. Distinguishing reactive proliferations from authentic NK-LGLL poses a significant diagnostic challenge. Herein, we developed a score based on NK-lymphocytosis, KIR repertoire, and mutational profile, using data from a cohort of 114 patients. The score demonstrates a sensitivity of 83% and a specificity of 96% for diagnosing NK- cell LGLL. Additionally, we identified TET2 gene mutations in 34% of LGLL cases and hypothesized that this mutation could be an early event in disease development. Furthermore, we conducted the analysis of the TRB repertoire through high-throughput sequencing in 49 T-LGLL patients included in the national LGLL treatment protocol. We demonstrated an overrepresentation of the TRBV2 gene in LGLL clonotypes compared to polyclonal controls. TRBV2- positive patients exhibited deeper neutropenia, lower lymphocytosis, and a distinctive cytokine profile characterized by elevated levels of IL-15, IL-17, and TNFα. Notably, two of these patients experienced a transformation of LGLL into high-grade T- cell lymphoma. Sequential analysis by whole exome sequencing of these two cases unveiled the pivotal role of TP53 mutations in the transformation process. This work has improved our understanding of the molecular profile of LGLL and offers new therapeutic options for this rare condition. | |||