| Etude du rôle d'EXOSC10 dans l'ovogenèse et la folliculogenèse (Role of EXOSC10 in oogenesis and folliculogenesis) Demini, Leïla - (2022-03-11) / Universite de Rennes 1 - Etude du rôle d'EXOSC10 dans l'ovogenèse et la folliculogenèse
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Langue : Français, Anglais Directeur(s) de thèse: Jamin, Soazik; Petit, Fabrice Discipline : Biologie cellulaire, biologie du développement Laboratoire : IRSET Ecole Doctorale : Biologie-Santé Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie Mots-clés : Ovaire, Ovogenèse, ARN, Insuffisance Ovarienne Primaire
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Résumé : EXOSC10 est l'une des sous-unités de l’exosome nucléaire qui possède une activité exoribonucléase et est impliquée dans la maturation, la dégradation et la surveillance des ARN. Afin d’étudier le rôle d’Exosc10 dans l’ovogenèse, nous avons généré des souris Exosc10cKO(Gdf9) pour lesquelles Exosc10 est spécifiquement inactivé dans les ovocytes dès le stade follicule primordial. Ces souris sont infertiles. Une ovulation est observée mais les ovocytes sont de très mauvaise qualité. Les rares ovocytes fécondés, cultivés in vitro, ne se développent pas au-delà du stade 2 cellules. L’étude histologique des ovaires Exosc10cKO(Gdf9) a montré qu’ils sont dépourvus d’ovocytes à partir de 8 semaines, ce qui suggère une perte précoce de leur réserve ovarienne. Une analyse protéomique des ovaires à 8 semaines a montré que la perte d’Exosc10 dans les ovocytes entraîne une forte diminution de protéines impliquées dans la maturation ovocytaire et dans les premières étapes du développement embryonnaire, comme les protéines du « subcortical maternal complex ». Ces résultats montrent qu’EXOSC10 est essentiel à la maturation ovocytaire et que les souris Exosc10cKO(Gdf9) pourraient servir de modèle d’insuffisance ovarienne primaire, un syndrome dont souffrent 1% des femmes. L’analyse de souris Exosc10cKO(Amhr2) pour lesquelles Exosc10 est invalidé dans les cellules de la granulosa de l’ovaire et les cellules mésenchymateuses de l’utérus et de l’oviducte a montré que ces souris sont fertiles, et aucune différence histologique n’a été observée au niveau du tractus génital en comparaison avec des femelles contrôles. Ce phénotype peut être dû à une inactivation d’Exosc10 incomplète ou bien à une implication plus importante dans ces types cellulaires de l’exoribonucléase DIS3, homologue d’EXOSC10. Abstract : EXOSC10 is one of the subunits of the nuclear exosome that has an exoribonuclease activity and is involved in RNA maturation, degradation and monitoring. In order to study the role of Exosc10 in oogenesis, we generated Exosc10cKO(Gdf9) mice in which Exosc10 is specifically inactivated in oocytes from the primordial follicle stage. These mice are infertile and ovulate mostly degraded oocytes. The rare fertilized oocytes, cultured in vitro, do not develop beyond the 2-cell stage. Histological study of the Exosc10cKO(Gdf9) ovaries showed that they are devoid of oocytes from eight weeks of age, suggesting an early loss of their ovarian reserve. A proteomic analysis of the ovaries at eight weeks showed that the loss of Exosc10 in the oocytes leads to a marked decrease in proteins involved in oocyte maturation and in the first stages of embryonic development, such as the proteins of the « subcortical maternal complex ». These results show that EXOSC10 is essential for oocyte maturation and that Exosc10cKO(Gdf9) mice could be used as a model of Primary Ovarian Failure, a syndrome observed in 1% of women. Analysis of mice with Exosc10 invalidated in granulosa cells of the ovary and mesenchymal cells of the uterus and oviduct showed that these mice are fertile. Histological analyses of reproductive tracts showed no differences between control and mutant female mice. This phenotype might be due to an incomplete inactivation of Exosc10 or to a compensatory effect of the exoribonuclease DIS3, homolog of EXOSC10, in these cell types. | |||